仪器指南

免疫组化实验室简介

浏览次数: 发布时间:2017-09-29
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  免疫组化实验室现拥有先进的常规病理技术大型设备,包括:恒冷箱切片机、自动脱水机、石蜡切片机、包埋中心、图象分析系统。可开展经典病理学制片,特殊染色,免疫组织化学,原位杂交和其他分子病理技术。

  免疫组化室使用注意事项及流程

  安全守则

  1. 做实验必须经过中心实验室的同意,必须遵守中心实验室的一切规定。

  2. 小心使用仪器,恒温箱及水浴锅高温不可无人看管或过夜使用,使用后进行登记。

  3. 不能使用明火,以免引燃有机试剂。使用有毒害可挥发液体操作需在通风厨内进行。

  4. 如果晚上做实验需要提前说明。

  5. 最后离开时,必须关上机器、关上电源。

  6. 保管好个人物品,一切自带物品丢失责任自负。

  标本处理注意事项:

  新鲜组织应及时固定,一般推荐使用10%福尔马林固定6-24小时。切成不超过1.5╳1.5╳0.5cm3大小的组织块。根据特殊检查(特殊染色和组织化学染色、免疫组织化学染色和原位杂交)的需要,选择其它适宜的固定液进行固定。如果需要进行脱水、浸蜡程序请与负责老师联系。

  包埋中心使用注意事项:

  1. 需与负责老师预约好使用时间,并提前准备好组织块。

  2. 实验耗材由实验室提供。

  3. 使用结束后需清理干净石蜡残渣。

  石蜡切片机使用注意事项:

  1.使用前请提前预约。

  2.自己准备中楷毛笔及干净镊子和载波片。

  3. 使用结束后应清理干净所有残渣,锁好刀头。

  冰冻切片机使用注意事项:

  1. 使用冰冻切片机者应购买一次性刀片及借用金属圆托。

  2. 自己准备好冻存的标本、OCT和涂有防脱片剂的载玻片。

  3. 使用结束后应清理干净所有残渣,刀位调至中位处并锁好刀头,机器在一般情况下维持机箱温度在–10℃左右,不必关机。

  图象分析系统使用注意事项:

  1. 必须经过负责老师的同意方能使用显微镜,不能擅自使用。

  2. 显微镜关机后如需使用必须间隔30分钟以上。

  3. 因显微镜灯泡属消耗品,希望使用时节约时间,以增加灯泡寿命。

  4. 不能使用移动硬盘和U盘,以免将病毒带入。采图后和负责老师联系刻录光盘。光盘5元/每张。

  5. 望大家爱护仪器,小心使用。

  免疫组化实验安全操作流程:

  1. 冰冻切片保存于–70℃,用冰甲醇及丙酮各固定5分钟。石蜡切片用专用透明剂脱蜡,用乙醇及PBS洗后加入修复液,在微波炉或高压锅中修复抗原。

  2. PBS洗片后用封闭液封闭一小时,用生物素标记的二抗者需先用H2O2阻断内源性过氧化物酶。

  3. PBS洗标本后加入一抗在室温下作用一小时。

  4. 用清洗液洗三次,每次5分钟。

  5. 加入二抗,室温下作用一小时。

  6. 在清洗液中洗三次,每次5分钟。

  7. 若二抗为荧光抗体应在暗盒中操作及保存,然后用荧光显微镜照相。

  8.若二抗为生物素标记,应该用链亲和素结合的辣根过氧化酶再作用一小时,然后清洗3次,每次5分钟,然后用DAB显色。若二抗为碱磷酶标记,则用NBT/BCIP显色。

  9.显色后用苏木精复染,封片。


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