ABI 7300/7500型实时荧光定量PCR将PCR热循环、荧光检测和各种应用分析软件结合在一起，可以动态观察PCR每一循环各反应管中PCR扩增产物逐渐增加的情况。PCR实验结束后可以马上得到定量结果。本仪器采用96孔反应板或单管及8联管，反应体积25 --100 µl，实验可以在不到2小时内结束。请使用本仪器者遵守下列规定：

　　1. 提前预约(不得超过3天)---登在仪器记录本上。如果情况有变化请及时取消预约。

　　2. 本仪器使用的试剂、耗材、样品请自行解决。

　　3. 初次使用本仪器者请在老师指导下操作。

　　4. 每次实验完成请及时取出实验样品、关机并进行使用登记。

　　5. 实验完成后清理存储文件，以为他人提供足够的使用空间。

　　6. 实验中如有异常请及时报告。

　　7500荧光定量PCR仪使用说明

　　l 注意事项： 实验过程必须戴干净的一次性乳胶手套进行操作。 PCR反应所用的96孔板、8联管或单管必须为ABI7500专用，凸盖PCR管禁止使用。 使用8联管两侧需用空管支撑，使用单管四角需用空管支撑，以防止板槽受力不均。

　　l 操作步骤:

　　(一) 开机 依次打开电脑显示屏、主机，输入开机密码7500，待电脑启动稳定后，按压7500仪器电源按扭，等待仪器启动(约30 s)

　　(二) 放入反应板 当仪器只显示Power状态指示灯时，打开托盘，方入反应板，关闭托盘(右上方45度角用力推压托盘右侧的圆形凹槽)。

　　(三) 创建反应板文件 1. 打开SDS软件，在对话框中选择Create New Document，或选择菜单栏File > New; 2. 从 Assay下拉列表中选择反应板类型; 3. 为反应板文件命名，单击Next 4. 选择要添加到反应板文件的探针(引物)，单击Add添加选中探针(如果在列表中未列出所需探针，单击New Detector创建新探针) 5. 单击Next

　　(四) 为每个反应孔指定探针和任务 1. 选取探针相同的反应孔，点击反应孔对应的探针。 2. 单击 Task栏的下边指定探针任务，选择 Use (使用)。 3. 单击 Finish (完成)。

　　(五) 为反应孔设置样品名 选取反应孔，直接输入相应样品名(也可右键，调出反Well Inspector对话框，在Sample Name中进行修改)

　　(六) 设定PCR循环参数、运行程序 1. 选择 Instrument选项卡，默认条件下显示标准PCR条件，可跟据实验情况修改; 2. 单击Add Dissociation Stage添加溶解曲线循环; 3. 修改PCR反应体积; 4. 将反应板文件保存至指定路径。 5. 点击Start运行程序

　　(七) 结束实验 1. 实验结束后关闭软件。(确认反应板文件数据已保存) 2. 打开拖盘，将反应板取出，关闭拖盘。 3. 按下7500仪器电源开关关闭机器。 4. 关闭电脑及显示屏。 5. 登记仪器使用情况。

　　请严格按照仪器使用说明进行操作，如有不明之处或遇其他情况请及时联系实验室2656或2752。